哥德堡大学、卢布尔雅那大学和巴黎大学的研究人员通过使用Simoa HD-X 的Homebrew平台 ，建立针对p-tau217和p-tau181片段N端的新型免疫分析方法，发现N-p-tau217在鉴别早期MCI-AD和Non-AD型MCI有更好的准确性，有望成为特异性监测AD早期进展的特异性生物标志物。

 题目 

 Head-to-head comparison of clinical performance of CSF phospho-tau T181 and T217 biomarkers for Alzheimer’s disease diagnosis 脑脊液生物标记物p-tau 181和p-tau217在阿尔茨海默病诊断中临床表现的面对面比较

 期刊 

 Alzheimer's & Dementia IF=17.127

 DOI: 10.1002/alz.12236

 研究单位 

 瑞典哥德堡大学萨尔格伦斯卡学院神经科学和生理研究所精神病学和神经化学系;斯洛文尼亚卢布尔雅那大学医学中心神经内科;巴黎大学认知神经病学中心

 研究背景 

 随社会老龄化而逐步上升，阿尔茨海默病(AD)已经成为重要的社会公共卫生问题。虽然目前已有多种药物治疗能够减轻AD症状，但无一能够改变疾病进程。因此对AD进行早期发现、早期诊断、早期治疗尤为重要。脑脊液 p-tau181相比Aβ病变对AD病理具有高度特异性，但目前建立的针对p-tau181的检测方法只在AD患者的轻度认知障碍(MCI) 晚期和痴呆阶段检测异常。多项研究表明p-tau217可能是AD早期的生物标志物，在伴随出现的Aβ病变的AD早期表达增加，但缺乏对其临床数据的检测和比较。

 研究目的 

 利用Simoa HD-X Homebrew平台构建的脑脊液p-tau217和p-tau181片段N端区域的新型免疫检测方法与传统Mid-p-tau181检测方法的临床数据进行比较，评估三种不同的p-tau在三个独立群体中: (1)在MCI-AD和AD痴呆患者中p-tau生物标志物的变化模式，(2)鉴别早期MCI-AD和Non-AD型MCI的准确性，(3)p-tau生物标志物与Aβ病变的相关性。

 研究方法

 生物标志物的开发和验证：

 捕获针对p-tau217(# 44-744, Invitrogen)的兔多克隆抗体，并与磁珠(# 103207, Quanterix )结合。采用针对N-端6-18aa表位的小鼠单克隆抗体Tau12 (#806502, biolegen2)作为检测抗体进行检测。标准品为磷酸化重组全长tau-441(#TO8‐50FN, SignalChem)。(N-p-tau217，LLOQ为0.35 pg / ml，N-p-tau181的LLOQ为1.0 pg / ml)，针对已建立的中段抗原表位Mid-p-tau181检测方法作为参考，包括ELISA和Lumipulse。

 研究对象分组：

 检测组来自瑞典默恩达尔萨尔格伦斯卡大学医院;验证组来自斯洛文尼亚卢布尔雅那大学医学中心和费尔南多维达尔大学医院。参与者接受了全面的临床检查，包括神经学、神经心理学、脑脊液和磁共振成像评估：MCI-AD参与者的Aβ42/Aβ40降低，p-tau181和total-tau正常。Aβ-CU、Non-AD型MCI和Non-AD痴呆参与者CSF生物标志物图谱正常。Non-AD型MCI包括精神疾病和非神经退行性疾病。

 实验结果

 1. 在MCI-AD和AD痴呆患者中p-tau生物标志物的变化模式

　　图1. 三个独立分组中p-tau生物标志物的浓度

 与Aβ认知未受损(Aβ-CU)组和Non-AD型MCI相比，AD痴呆患者中所有p-tau(N-p-tau217，N-p-tau181，Mid-p-tau181)生物标志物均升高，Simoa建立检测方法与金标准检测p-tau在MCI-AD和AD痴呆患者中变化模式相同，并且可以检测到临床正常人大脑中相对更低浓度的AD生物标志物的变化。

      表1. 检测组和验证组中不同p-tau形式的倍数变化

 对于AD痴呆，N-p-tau217的倍数变化为9.2 - 11.5，N-p-tau181的倍数变化为3.2 - 6.0，Mid-p-tau181的倍数变化为2.2 - 3.6。对于MCI-AD，N-p-tau217的倍数变化为3.5 ~ 3.7，N-p-tau181为1.8 ~ 2.2，Mid-p-tau181为1.3 ~ 1.6。

 AD痴呆和MCI-AD患者CSF中N-p-tau217倍变化倍数均高于N-p-tau181和Mid-p-tau181变化(all P < .05)，该方法可更加灵敏和准确地监控早期疾病的发生。

 2.鉴别早期MCI-AD和Non-AD MCI的准确性

 Simoa HD-X平台检测N-p-tau217，N-p-tau181比Mid-p-tau181金标准检测方法可以更灵敏和准确地区分AD和Non AD。

　　图2. p-tau生物标志物在鉴别Aβ病变增加、区分MCI-AD与Non-AD型MCI、区分AD型痴呆与Non AD型痴呆方面的准确性

 3. p-tau生物标志物之间的一致性及其与Aβ病变的相关性

 N-p-tau217与两种不同形式的p-tau181和total-tau均有较高的相关性，并且这些相关性在Aβ+病例中高于Aβ-病例。

 讨论

 利用Simoa HD-X Homebrew平台构建的新型磷酸化Tau蛋白的检测方法， 使N-p-tau217有望成为特异性监测AD早期进展的生物标志物。对AD早期生物标志物的超高灵敏度的检测有十分重要的临床意义并且在预后、进展监测和治疗中的结果衡量方面具有潜在用途。相对传统检测方法，Simoa HD-X建立的新型检测方法在推进AD人群筛查和临床试验方面具有更好的潜力。但相对于微创的血液检测在临床方面更易于推广和使用的优势来说，该研究利用Simoa HD-X建立的针对脑脊液中N-p-tau217检测方法仍有不足。

 参考文献

 [1] Karikari TK, Emeršič A, Vrillon A, et al. Head-to-head comparison of clinical performance of CSF phospho-tau T181 and T217 biomarkers for Alzheimer's disease diagnosis[J]. Alzheimers Dement. 2020. doi: 10.1002/alz.12236.