PART 1 固有方法下新增小粒径规格色谱柱

　　SUMMER

　　Evosep One原来固有的5种色谱方法(划重点，Evosep One每个梯度方法系统都是自己设定好的，选择对应的方法即可，快速简便)，在每个方法下有各自推荐的色谱柱规格类型，可以看到之前建议使用的都是基于3μm粒径的色谱柱规格。

　　随着Evosep One的升级，在ASMS会议上Evosep新出了基于每种色谱方法下新推荐的色谱柱规格(如下图)，其中最大的变化是新增了粒径更小的1.5μm或者1.9μm的色谱柱。

　　那么在这些新出的色谱柱下，我们的数据能达到什么结果呢?

　　样本：Hela细胞，500ng配置：Evosep+Orbitrap Exploris 480Evosep One方法：如下表，室温条件质谱方法：如下表，DDA采集

　　结果：

　　(1)如下图，较之以往的3μm色谱柱上的结果，在新推出的色谱柱条件下的鉴定数均较以往增加。如在DDA采集模式下，30 samples/day的方法能够达到蛋白鉴定数3935，较之以往的鉴定数增加38%。

　　(2)将鉴定数/每个方法有效梯度时间，得到单位时间内的蛋白鉴定数。由此，我们可以推测，当我们选择以下方法中通量较高的方法时(如200 samples/day)，一些多维分级策略处理的样本会比较合适。当想对通量和深度做一个折中时，类似60 samples/day的方法会比较合适。

　　PART2 推出Performance Column

　　让我们回到这张图，我们可以看到在100 samples/day和60 samples/day方法下，新出的这根色谱柱有一个别称叫做“High Performance”。

　　结果：(1)在100 samples/day和60 samples/day方法下，BSA样本，提取峰722，分别使用Standard Column和Performance Column，Performance Column下色谱峰峰宽变窄，峰容量增加。

　　(2)将Evosep One搭配Orbitrap Exploris 480 MS，分别在60 samples/day和100 samples/day的方法下进样不同上样量的Hela样本，使用Performance Column和Standard Column达到的蛋白鉴定数对比。可以从下图中看到，在上样量5ng的条件下，使用Performance Column较之以往增加的蛋白鉴定数最多。

　　PART 3 Evosep +

　　SUMMER

　　Evosep还发布了Evosep +扩展方法，即在原先的5种标准方法下，新发布了15 samples/day的方法，一针92 min，包括其中的88 min有效梯度和4 min的Overhead time，该方法下的色谱柱规格是15 cm, 150μM*1.9μM。该方法的研发是为了满足更高深度的需求。

　　很多客户常常会有个疑问，Evosep One的通量大是基于什么原理实现的，大家可以看下面的图，AS(自动进样器)、ABCD4个低压泵和HP高压泵在很多环节的时候都是同时运行功能的，这样就大幅度节省了时间。

　　接下来看一下在该方法下的结果。

　　结果：(1)如下图，分别在3台Evosep One机器上测试，选取15 samples/day的方法，提取BSA样本的5个离子峰，峰形优异且保留时间稳定。

　　(2)分别在2个不同的实验室测试Evosep One，每个实验室分别用其自己专有的方法来处理Hela样本。从下图中可以看到，在15 samples/day的方法下，500 ng的Hela上样量在Site 1和Site 2得到的蛋白鉴定数差不多，几乎能达到5000。而在上样量较小的情况下如5ng，结果稍有点差异，可能是由于每个实验室前处理不同引起。

　　总结，Evosep在新色谱柱和新功能扩展下得到的数据较之以往进一步优化，能给客户带来更好的仪器性能和数据质量上的体验。