丹麦日德兰半岛西南医院神经病科等研究院的学者，利用Simoa技术检测了两个不同的实验室设备之间，多发性硬化患者和健康人群的血浆和CSF中的NfL水平，结果显示使用SIMOA技术测量的CSF和血液中的NFL结果在不同的实验室之间是可比的。但是，当检测值与cut-off值相邻时，不同的敏感性/特异性会影响对检测结果的临床解释，因此医疗保健从业人员应考虑不同实验室的cut-off值。

　　01、题目

　　Comparison of neurofilament light chain results between two independent facilities.

　　02、出处

　　BMJ Neurology Open

　　03、研究机构

　　丹麦日德兰半岛西南医院神经病科、南丹麦大学区域健康研究系、美国Biogen

　　04、研究背景

　　神经丝轻链(NFL)是神经轴突损伤的非特异性标志物，目前正在研究NFL在几种神经系统疾病中的疾病监测和管理的潜在能力。通过不同技术测量NFL水平发现，目前比较灵敏的市售测定法是Quanterix的单分子阵列技术(SIMOA)。本研究在两个不同的实验室设备上比较了SIMOA测得的165例脑脊液(CSF)和225份血样中NFL水平之间的差异，探讨了潜在差异是否会影响基于NFL水平的多发性硬化症(MS)中临床活动的解释。

　　05、研究方法

　　实验对象：复发性多发性硬化症的MS患者，并接受富马酸二甲酯(DMF)治疗24个月。

　　实验处理：分别对MS患者(n = 52)和健康对照(HCs)(n = 23)的受试者在入组时，治疗的第3、6、12和24个月时收集血浆，在入组时和DMF治疗12个月后收集CSF。

　　因子检测：收集血液样本于EDTA样本管中，血液样本和CSF样本在收集的30-60min之内在20℃的条件下以2000g离心10min。将血浆和CSF分装在500μL管中并保存在-80°C下直到进行批量分析。利用SIMOA技术在HD-1平台上测定EDTA血浆和CSF中NfL的浓度。

　　06、研究内容

　　分别对在两个不同的实验室设备采用Simoa测量的165个CSF和225个血浆样品中的NFL浓度进行了分析和比较，使用线性回归进行相关性分析，并通过Bland-Altman分析检查了两个site的两个分析之间的一致性。分析两个实验室检测的数据发现，两个实验室设备之间的CSF和血浆浓度在同组之间无显著差异(p>0.99)，结果如表一和Fig 1A&B所示：

　　表一 两个不同的实验室中测得的血浆和CSF中NFL水平的比较

　　相关性研究发现，实验室之间的CSF和血浆浓度均高度相关(R: 0.92和0.84，p<0.0001)，结果如Fig1 C&D所示。

　　通过Bland-Altman分析计算发现，与site 1相比，site 2测得的血浆和CSF的NFL浓度均较低。比较两个site测得的相同CSF和血浆样品中的NFL浓度时，除少数异常值(1%–2%)外，差异较小，结果如Fig1 E&H所示。

　　Fig.1 两个不同的实验室中测得的血浆和CSF中NFL水平的比较

　　通过ROC分析计算了实验室设备检测的血浆和CSF的疾病cut-off值。site1和site2的CSF疾病cut-off值分别为807.5和571.0 pg/mL。血浆的疾病cut-off值分别为13.0 pg/mL和11.8 pg/mL。

　　对于CSF，我们发现在site1的敏感性和特异性为80.0%和100.0%，而site2的敏感性和特异性为92.0%和100.0%。对于血浆，我们发现在site1的敏感性和特异性为46.8%和100.0%，而site2的敏感性和特异性为63.6%和100.0%。对于site1和site2，CSF的ROC曲线下面积分别为0.93和0.98，血浆ROC曲线下面积分别为0.76和0.94。

　　使用这些确定的cut-off值，在两个实验室设备上检查单个样品中NFL的浓度发现，在不同实验室设备上进行测量时，在119个CSF样本中，有3个样本(2.8%)因低于/高于cut-off值，需要被重新分类为正常/异常，在180个血浆样本中有7个(3.9%)需要被重新分类为正常/异常。

　　因此对于同种样本，同组之间的结果在不同实验室设备检测没有差异。线性拟合回归显示不同实验室设备之间的良好相关性，CSF中的相关性高于血浆。与site1相比，site2在血浆和CSF中的敏感性均稍高。cut-off值和敏感性/特异性的差异导致血浆和CSF中低于或高于cut-off值的约有3%–4%的患者样品重新划分。在一小部分MS患者中，实验室方法的可变性和血浆中较低的敏感性可能导致基于血浆NFL的检测结果解释为“无临床活动”，而CSF或同一个样本在其他实验室的结果可能得出相反的结论。

　　07、研究结论

　　本文发现，使用SIMOA技术测量的CSF和血液中的NFL结果在两个不同的NFL实验室之间是可比的。但是，不同实验室设施的cut-off值，特别是在比较由不同仪器分析的连续样本时，当检测结果接近cut-off值时，不同的敏感性/特异性会影响大约4%数据的分类，且在单个患者的水平上，应尽量使用同一设备进行检测。