一、背景及目的

　　血浆样本中的NFL检测作为实验室最常见的样本类型及检测服务需求量最大标志物，针对血浆样本中的NFL蛋白的保存稳定性一直未进行实际确定，通过此次测试可初步确定在不同操作环境下NFL蛋白在血浆样本中的稳定性并可指导后续生产实验中的样本处理操作。

　　二、实验设计

　　1、样本准备：

　　测试所用样本为早期客户提供的剩余血浆，便于后期比对数据所有测试条件均使用同一血浆样本完成：3mL血浆样本涡旋混匀，10000g离心5min，取澄清样本每管分装150μL，-80℃冻存备用。

　　2、样本处理条件：

　　处理温度为常温(~23℃)及冷藏(~4℃)两组实验条件，每组设置7个保存处理时间，共计14个实验条件，其中处理时间为0的样本作为正常操作阳性对照，-80℃解冻混匀后与其他测试组样本一同上机检测。

　　3、上机检测：

　　使用Simoa NF-Light Advantage Kit(502625)，所有测试样本均一同上机检测，由仪器进行2重复4×稀释，所有标曲点与样本一同2重复参与上机检测，试剂盒内参不参与上机检测。

　　三、实验操作流程：按Quanterix NFL protocol及实验室常规技术服务流程

　　四、实验测试数据

　　1、标曲数据：

　　标曲R2及CV等质控参数均正常。

　　2、样本数据：

　　(1)组间组内数据差异

　　(2)与对照样本(0号样本)数据差异

　　五、初步结论

　　血浆样本内的NFL蛋白稳定性较高，在室温/4℃存放48h内，对NFL蛋白的Simoa检测结果无明显影响。