QuanterixQuanterix provides the ultrasensitive HD-1 instrument for protein detection. Right now we come to China.

　　Overview来自国立台湾大学神经内科中风中心的研究, 通过使用Simoa 神经4重检测试剂盒(NfL,GFAP,UCH1,Tau), 在CADASIL患者中，血浆NfL可以作为预测卒中(中风)的一个非常有希望的生物标志物，而GFAP可能在脑出血类中风的预测中发挥作用。

　　01、题目

　　Plasma neurofilament light chain and glial fibrillary acidic protein predict stroke in CADASIL | 血浆中NFL和GFAP表达水平可以预测CADASIL患者的中风可能

　　02、期刊

　　Journal of Neuroinflammation. (2020) 17:124. https://doi.org/10.1186/s12974-020-01813-5

　　03、作者单位

　　Stroke Center and Department of Neurology, National Taiwan University | 国立台湾大学神经内科卒中中心

　　1. 研究背景CADASIL(cerebral autosomal dominant arteriopathy with subcortical infarcts and leukoencephalopathy)中文名叫“伴皮质下梗死和白质脑病的常染色体显性遗传性脑动脉病”，是一种遗传性小动脉病变，研究表明19号染色体上的Notch3基因突变导致发病。表现为皮质下缺血事件，并导致进行性痴呆伴假性球麻痹。

　　CADASIL病人易患脑内出血，进而导致复发性中风症。然而，目前此领域并未发现准确可靠的预测中风的血液生物标志物。

　　2. 研究目的本研究旨在探讨血浆生物标志物是否能反映疾病严重程度，预测CADASIL患者的卒中复发情况。

　　3. 实验方法对63名CADASIL患者(CADASIL患者)的血浆生物标志物进行检测。从一个多中心登记处招募了63名CADASIL患者(平均年龄58.9±9.3岁，男性63%)和17名对照。

　　在基线(baseline)使用超敏感单分子阵列测量血浆生物标志物，即神经丝轻链(NfL)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、tau和泛素羧基末端水解酶L1(UCHL1)。

　　评估的神经影像学标志物包括白质超强度的Fazekas量表、裂隙的数量和脑微泡(CMBs)。应用Cox比例危险回归模型计算基线时血浆生物标志物在随访期间预测卒中事件的危险比(HR)

　　实验方法具体描述

　　The blood sam-ples were analyzed through the Neurology 4-Plex assay established by the Simoa platform (Quanterix Simoa HD-1 ; Lexington, MA, USA). The assay could quantify the plasma concentrations of NfL, GFAP, tau, and UCHL1 simul-taneously, and the measurement details are as described previously

　　The lower limits of detection of NfL, GFAP, tau, and UCHL1 assays were0.039, 0.0265, 0.011, and 3.991 pg/mL, respectively, whereas thelower levels of quantification were 0.241, 0.467, 0.053, and 5.45pg/mL, respectively.

　　4. 实验结果

　　CADASIL患者血浆NfL、GFAP和UCHL1水平显著高于对照组。血浆NfL和GFAP水平均与CMBs的数量呈正相关(r = 0.32 and r = 0.37，p < 0.05)。血浆NfL, GFAP高水平基线表达与较高中风相关(odds ratio分别为2.02和2.06)。在后期随访3.1 ± 2.1年中，10名患者发生中风现象，6名患者为出血性中风(ICH)。较高NfL水平预示较高意外性中风，较高GFAP水平预示较高出血性中风可能。

　　CADASIL和对照组的血浆生物标志物水平。患者的NfL、GFAP和UCHL1水平高于对照组。NfL在卒中患者(仅有IS或曾有ICH)中较高。GFAP在ICH患者中最高。*p <0.05，**p <0.01。

　　4个生物标志物预测意外「中风」事件a和「脑出血」事件b的ROC曲线。

　　NFL和FGFAP基线表达浓度与意外「中风Stroke」和意外「脑出血ICH」生存的Kaplan-Meier图. 设定阈值, NFL基线表达高于39pg/ml, GFAP基线表达高于140pg/ml, 50月后存活时间开始大大降低,揭示基线浓度的表达水平可以预测中风的发生和存活率.

　　NfL (neurofilament light chain)神经丝蛋白轻链，血清与脑脊髓液中NfL浓度高度相关，与多种神经退行性疾病进程高度相关。GFAP(Glial fibrillary acidic protein)胶质纤维蛋白酸性蛋白，大脑受损后由星形细胞特异性分泌的中间丝蛋白，其研究可区分出血性中风和缺血性中风。UCHL1(Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase L1)泛素化羟基水解酶，在急性缺血性中风中明显升高。Tau 蛋白，阿尔茨海默症的生物标志物，与急性中风或有相关。CMB (cerebral microbleeds)脑微出血ICH (Intracerebral Hemorrhage)出血性中风, 脑出血, 脑溢血IS(Ischemic stroke)缺血性中风, 俗称脑梗死

　　图片来自百度健康宝典

　　5. 实验结论在CADASIL患者中，血浆NfL可以作为预测卒中(中风)的一个非常有希望的生物标志物，而GFAP可能在出血性中风预测中发挥作用.

　　Simoa神经试剂盒(部分)