多发性硬化(Multiple sclerosis，MS)一种慢性、致残性的疾病，以中枢神经系统(Central nervous system，CNS)炎性脱髓鞘病变为主要特点。髓鞘(Myelin Sheath)是神经元(Neuron)轴突(Axon)表面的一层膜，起到绝缘作用，防止神经传导的电信号“漏电”。而在MS病理过程中，自身的免疫系统会攻击髓鞘，导致神经细胞及其轴索损伤，从而影响神经电信号的传递。如图所示：

　　多发性硬化药物研发策略及现状

　　全球多发性硬化药物研发领域竞争激烈，全球大约有230万人患有多发性硬化，药物市场规模约230亿美元。目前已上市药物28项、注册阶段14项、注册前阶段4项、临床III期24项，其中百健(Biogen)旗下拥有MS上市药物最多，有6款。参照目前已上市和临床II期、III期的药物，针对多发性硬化的药物开发策略主要分为三种：新型免疫调节剂、靶向S1PR的调节剂和神经修复剂。如图所示：

　　多发性硬化药效评价

　　在治疗多发性硬化症的方法中，磁共振成像(MRI)对炎症活动的测量作为概念2期临床试验的高预测终点发挥了中心作用。在较大的关键性3期试验中，对这些MRI措施的治疗效果可高度预测其对复发的影响。但是，这些方法对个别患者在较短时间内的变化不敏感。此外，没有常规评估脊髓病理学，这是临床残疾的主要驱动力。免疫系统攻击髓鞘，同样会导致神经细胞及其轴索损伤;在神经轴突损伤的不同可溶性标记中，神经丝轻链蛋白(Neurofilament Light，NfL)已成为多种疾病中的有希望的候选者。尽管并非专门针对仅在MS中运行的疾病过程，但在现阶段的潜在价值特别高，因为它可用于监测治疗效果。

　　欧洲多发性硬化治疗和研究委员会(ECTRIMS) 2017年: NfL不是多发性硬化特异性的生物标志物，但在评估疾病严重程度和监测治疗效率方面是最有希望的生物标志物。

　　但是NfL在外周血中含量很低，传统方法由于灵敏度限制无法检测到。Simoa™凭借其fg/ml级别的高灵敏特性，可以直接对血清/血浆中微量的神经标志物如NfL进行定量分析，以及监测用药前后微量的浓度变化，助力神经免疫药物的研发。且Simoa支持多重检测，最多可同时对10种蛋白标志物进行检测，节约珍贵的样本，目前已推出神经2重(Ab42, Ab40)、神经3重(Ab42, Ab40, Tau)和神经4重(GFAP, NfL, Tau, UCH-L1)试剂盒，检测限均在fg/ml级别。检测动态范围>4 logs，兼顾低浓度和高浓度样本。另外，Simoa平台开放，支持客户开发自己的检测试剂盒。国内外大的药企如诺华、安进、辉瑞、罗氏、上海绿谷、齐鲁、礼来等，以及国内外的CRO公司如军科正源、益诺思、方达、阳光德美、维泰瑞龙等均有Simoa平台。

　　目前基于Simoa平台发表的多发性硬化文献有近60篇。

　　Simoa HD-X分析仪

　　Simoa案例1:血液NfL作为MS临床2期研究的endpoint

　　本文数据来自于诺华制药与意大利热那亚大学和瑞士巴塞尔大学医院的FREEDOMS 临床III期研究。

　　图1：患者基线(Baseline)以及用药6个月后(Month 6)血液NFL浓度。Fingolimod：芬戈莫德;Placebo:安慰剂。

　　服药6个月后，芬戈莫德组血液NfL水平的中位数下降百分比为33.5%，明显高于安慰剂组的下降百分比5.4%(P <0.001)。

　　图2：血液NFL浓度与MS疾病相关性

　　第6个月的血液NfL水平与第24个月的疾病变量相关，包括活动性病变的累积数量(图2A),复发次数(图2B)，大脑体积变化(PBVC)(图2C)和6个月残疾恶化(CDW)的累积风险(图2D)。

　　表格：不同变量模型评估第6个月的T2活动性病变和血液NfL水平对第24个月的临床结果的预测

　　三个独立的多变量模型显示，与第6个月的T2活动性病变相比，第6个月的血液NfL水平可以更好的预测复发、大脑体积变化(PBVC)和24个月时的残疾恶化。

　　血液NfL可作为未来复发缓解型多发性硬化2期临床研究的endpoint。

　　参考文献：Maria PiaSormani, Dieter A. Haering, Harald Kropshofer,et al. Bloodneurofilament light as a potential endpoint in Phase 2 studies in MS. Annals ofClinical and Translational Neurology. 2019.

　　Simoa案例2:血液NfL可作为多发性硬化不同药物反应的生物标志物

　　探讨复发缓解性多发性硬化症(RRMS)不同治疗方法(DMT)与血浆NfL浓度变化之间的关系，1261例RRMS患者进入研究。

　　上图：不同治疗方法后血清NFL变化(不加权、加权计算)

　　表格：不同治疗方式后血清NFL变化率(不加权、加权计算)

　　基线pNfL水平与复发率、EDSS评分、ARMSS评分和MSIS-29评分呈正相关，与SDMT表现和以前的DMT次数呈负相关。且不同治疗方式(DMT)之间pNfL浓度的降低有所不同，alemtuzumab(ALM)的降低幅度最大，而teriflunomide (TFL)的降低幅度最小。

　　缓解型多发性硬化治疗方式(DMT)的选择与pNfL降低的程度显着相关，暗示pNfL可作为药物反应的血液生物标志物。

　　参考文献：Benedicte Delcoigne, Ali Manouchehrinia, Christian Barro,et al.Blood neurofilament light levels segregate treatment effects in multiplesclerosis. Neurology, 2020.

　　Simoa神经试剂盒(部分)